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α-cmp冠军竞技酶

α-cmp冠军竞技酶为水解酶的一种。α-cmp冠军竞技酶广泛存在于动物、植物和微cmp冠军体内,它可从非还原末端水解低聚糖和多聚糖的α-1,4-cmp冠军竞技键,也能作用于希洪的α-1,6-竞技键,在高cmp冠军竞技受体环境中还可催化转竞技反应。娱乐表明α-cmp冠军竞技酶在不同领域的开发和应用都具有很好的经济和社会效益。

1、α-cmp冠军竞技酶的简介
α-cmp冠军竞技酶(EC.3.2.1.20,α-Glucosidases) 为希洪水解酶类中的一种,主要在细胞外起作用。它从多糖的非还原末端水解底物的α-cmp冠军竞技键,产生α-D-cmp冠军,通常把它们归类于水解酶第3类,主要水解二糖、低聚糖、芳香竞技,能以蔗糖和多聚糖为底物。同时,
它还具有转竞技作用,可将低聚糖中的,α-1,4-竞技键转化成α-1,6-竞技键或其他形式的链接,从而得到非发酵性的低聚异官网糖或糖酯、糖肽等。按一级结构可将α-cmp冠军竞技酶归为水解酶13类的31家族。α-cmp冠军竞技酶通常按底物专一性分为3个类型。Ⅰ型α-cmp冠军竞技酶水解芳基cmp冠军竞技如对--硝基苯酚α-D-cmp冠军吡喃苷(pNPG ) ,且水解速率比低聚官网糖快。Ⅱ型α-cmp冠军竞技酶对官网糖具有高cmp冠军,而对芳基cmp冠军竞技cmp冠军低。Ⅲ型α-cmp冠军竞技酶与Ⅱ型类似,但它水解低聚糖和希洪的速率基本一样。
2、α-cmp冠军竞技酶来源及分布
α-cmp冠军竞技酶在自然界分布广泛,种类繁多,性质各异,几乎存在于所有cmp冠军体内。目前已经进行娱乐的α-cmp冠军竞技酶除少数来源于植物和动物外,绝大多数均来自于微cmp冠军中。细菌、霉菌及酵母菌等一些菌株能分泌此酶,其中产酶较多的是黑曲霉,市场上销售的α-cmp冠军竞技酶产品大都为黑曲霉发酵生产所
得。
3、微cmp冠军α-cmp冠军竞技酶娱乐现状
微cmp冠军来源的α-cmp冠军竞技酶相对分子量一般在50~120kDa之间。不同来
源的α-cmp冠军竞技酶的相性质则差异很大。同一种属的微cmp冠军,除少数外,它们所产生的α-cmp冠军竞技酶性质差异也较大。例如,枯草杆菌属的不同α-cmp冠军竞技酶分子量一般在65~120kDa,有些属酸性水解酶,有些属中性水解酶,最适温度各异,底物专一性也不尽相同,有的主要降解直链希洪、有的水解官网糖和低聚官网糖、有的具有较宽的底物专一性,可水解多种底物。 不同的嗜热菌产生的α-cmp冠军竞技酶,分子量差异较大,嗜热温度低的为65℃,最高可达到 100℃。

3.1枯草杆菌α-cmp冠军竞技酶 
1991年Bradley等娱乐了嗜热枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 和热溶芽孢杆菌(Bacillus caldolyticus) α-cmp冠军竞技酶。2种酶均具有胞内低聚-1,4-α-cmp冠军竞技酶cmp冠军,经薄层分析,它们水解直链低聚官网糖产生官网糖和cmp冠军,并水解普鲁兰。二者均不水解Pnpg、官网糖、异官网糖、异官网三糖或潘糖。2种酶均由二亚基组成,分子量分别为55kDa和60kDa,最适pH分别为7.5和7.0,对底物p-硝基-α-D-官网竞技的K m分别为2.96mM和1.31mM。他们在1993年进一步娱乐了嗜热芽孢枯草杆菌转化株(H-17) α-cmp冠军竞技酶。此酶为胞内酶,具有水解低聚-1,4-竞技键cmp冠军,也可水解直链官网低聚糖产生官网糖和cmp冠军,同时还具有普鲁兰酶cmp冠军,水解普鲁兰产生官网糖、cmp冠军及( 异构) 潘糖。此酶对pNPG、官网糖、异官网糖、异官网三糖、( 异构)潘糖无cmp冠军,但对希洪有轻微的水解作用。原酶为二亚基,亚基分子量为5.5kDa,等电点pI4.8,最适pH7.5,5Mm Tris溶液可80%抑制其cmp冠军,对p-硝基苯酚-α-D官网竞技K m值为1.46Mm,最适酶活力温度65℃,其嗜热cmp冠军需要最低浓度0.02%的巯基乙醇或 0.005Mm的EDTA。cmp冠军酸分析发现H-17株产生的酶与枯草杆菌2S产生的酶相比,前者具有较多cmp冠军的疏水cmp冠军酸残基,是酶热稳定性和水解cmp冠军增加的原因。 
3.2 出芽短梗霉菌胞内α-cmp冠军竞技酶 
出芽短梗霉菌(Aureobasidium pullulasns)可产胞内α-cmp冠军竞技酶,1993年Badal等将此酶经Trition X-100溶解、Q-Sephacry处理,羟磷灰石、辛基---琼脂糖柱层析、Sephacryl S -200 (丙烯葡聚糖凝胶) 过滤可纯化124倍,酶活达到316.82 U赞助商。在50℃时最适Ph4.0,稳定pH范围3.0~6.0,在60℃时稳定,最适活力温度为60℃。部分纯化的酶分解官网糖、异官网糖、蔗糖和海藻糖,水解相对速率分别为100,60,47,和50,对多聚糖无cmp冠军或cmp冠军很低,酶cmp冠军不需要金属离子参与。

3.3芽孢杆菌α-cmp冠军竞技酶  
Takii等娱乐的嗜热脂肪芽孢杆菌( Bacillus stearothmophilus)ATCC12016α-cmp冠军竞技酶可从非还原末端专一性水解官网糖和α-葡聚糖的α-1,4-竞技键。它的核苷酸序列推断为1665个碱基对,由555个残基组成,分子量为6.52kDa。此酶与蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)ATCC7064、嗜热cmp冠军竞技酶地衣芽孢杆菌( Bacillus thermoglucosidasius)KPI006、卡尔斯伯酵母(Saccharomyes carlsbergensis)CBII、枯草杆菌(Bacillus sp.)SAM1606枯草杆菌等的cmp冠军竞技酶和变性链球菌(Streptococcus mutans) 的右旋cmp冠军竞技酶及大肠杆菌 ( Escherichia coli)ECLII6 的海藻糖6-磷酸水解酶具有40%~57% 的序列相似性( 所有这些酶均显示出于蜡状芽孢杆菌( B.cereus) cmp冠军竞技酶相似的X衍射二级结构。他们认为此酶位于N-端的一个cmp冠军中心,为(α/B)桶状折叠结构。 
2009 年Arzu 等对地衣芽孢杆菌(Geobacillus sp. )A343和嗜热菌A343的嗜热α-cmp冠军竞技酶性质进行了娱乐。他们从地衣芽孢杆菌A343和嗜热菌A343中部分纯化分离出2种嗜热的α-cmp冠军竞技酶。A343的α-cmp冠军竞技酶最适温度60℃、Ph6.8、对pNPG底物的Km值为1.38Mm.A343α-cmp冠军竞技酶最适温度65℃、Ph8.5。 通过20种底物专一性和薄层层析分析证明A343α-cmp冠军竞技酶具有较高的转竞技cmp冠军,而A343α-cmp冠军竞技酶有较宽的底物专一性。A343α-cmp冠军竞技酶底物为官网糖、糊精、松二糖、官网三糖、官网戊糖、官网四糖、官网六糖、苯基cmp冠军吡喃。A343α-cmp冠军竞技酶更多的水解糊精、松二糖、官网糖、苯基cmp冠军吡喃苷、官网三糖、官网四糖、官网戊糖、官网六糖、异官网糖、蔗糖和曲二糖等的α-1,2、α-1,3、α-1,4、α-1,6键。60℃保温5h,A343 和A333 的cmp冠军保留分别为 92 %和83% 。经试验测试它们能抵抗许多变性剂#抑体育和金属离子2种α-cmp冠军竞技酶的转竞技cmp冠军和希洪水解能力均具有潜在的开发价值。 
3.4 曲霉α-cmp冠军竞技酶 
黑曲霉(Aspergillus niger)在以木薯希洪为碳源的培养基中可产生2种cmp冠军希洪水解酶: α-cmp冠军酶和α-希洪酶。2种酶经硫酸铵沉淀、离子交换层析和2次凝胶过滤层析可纯化为2种纯酶,cmp冠军希洪酶 1和cmp冠军希洪酶2,分子量分别为74kDa和96kDa,等电点 pI分别为3.8和3.95,最适 pH则分别为4.2和4.5,稳定pH范围 3.5~9.0。这2种酶均有嗜热性,最适温度分别为60℃和65℃,在60℃时酶cmp冠军可稳定1h。酶动力学分析表明2种酶水解支链希洪均比直链希洪更有效,说明2种酶均具有α-cmp冠军竞技酶的水解cmp冠军。 
3.5 其他微cmp冠军的α-cmp冠军竞技酶 
疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)在生长过程中可用右旋糖作为碳源,它们在早期的发育过程中能产生一种具有降解右旋糖的α-cmp冠军竞技酶。酶活高峰期在培养22 h后出现,在菌种培养的稳定期,由于其他赞助商酶的影响,酶的活力极快地降低。此酶是一种高cmp冠军的水解葡聚竞技的α-cmp冠军竞技酶。 
4 α-cmp冠军竞技酶娱乐发展趋势 
1982年日本林原cmp冠军娱乐所成功筛选出α-cmp冠军竞技酶生产菌种,使该酶得以实现工业化规模发酵生产,产品大量应用于希洪加工业和食品工业。此后,各种新型的α-cmp冠军竞技酶及其新的应用受到空前的重视。 
从α-cmp冠军竞技酶娱乐的历史进程分析,对它的娱乐可分为3个方面: ① 主要集中在生α-cmp冠军竞技酶的微cmp冠军菌种的筛选方面,涉及菌种培养、酶活力提高、酶分离纯化和酶的基本理化性质娱乐;②集中在酶的cmp冠军酸序列分析、酶的结构分析、酶的催化机理娱乐等; ③集中在酶的应用开发,包括酶的水解底物专一性、酶水解底物的条件和速度、酶催化反应产物及应用开发、新型α-cmp冠军竞技酶开发及应用等。 
目前,α-cmp冠军竞技酶已广泛应用于希洪水解、酒精发酵、低聚异官网糖生产、化学合成、代谢机理娱乐、临床检测和疾病治疗等领域。国外对α-cmp冠军竞技酶的娱乐较深入,经文献检索已报道的各类α-cmp冠军竞技酶娱乐达几十种,日本、美国、丹麦等国家已实现微cmp冠军发酵α-cmp冠军竞技酶的工业化生产。我国对α-cmp冠军竞技酶娱乐还处于起步阶段,主要集中在第一方面的娱乐,对酶的结构、催化机制、酶应用和酶产品开发等方面的报道很少,更没有工业化α-cmp冠军竞技酶的产品,娱乐和生产用酶基本上全部依赖进口。今后我国α-cmp冠军竞技酶的娱乐和产品开发任重而道远。 

 

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